Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования




НазваниеГосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
страница1/5
Дата конвертации29.04.2013
Размер0.65 Mb.
ТипМетодические указания
  1   2   3   4   5
ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

КАБАРДИНО-БАЛКАРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ

УНИВЕРСИТЕТ им. Х.М. БЕРБЕКОВА


ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ НА DROSOPHILA MELANOGASTER

Методические указания

к практическим занятиям

по большому практикуму

Для специальности 020201 – Генетика


НАЛЬЧИК 2009


УДК

ББК

Рецензент:


Составители: Боготова З.И., Биттуева М.М., Керефова М.К.


Генетический анализ на Drosophila melanogaster: Методические указания к практическим занятиям по большому практикуму. – Нальчик: Каб. -Балк. ун-т, 2009. – 54 c


Методические указания к практическим занятиям по Большому практикуму составлены с учетом программы соответствующего курса, проводимого для студентов, специализирующихся по кафедре общей генетики, селекции и семеноводства КБГУ.

Цель издания - ознакомление с особенностями биологии, морфологи, генетики дрозофилы, обучение методике постановки генетических опытов и анализа результатов скрещиваний по изучению наследования признаков, используя линии дрозофилы коллекции кафедры общей генетики КБГУ.

Предназначено для студентов-биологов IV курса, бакалавров III курса биологического факультета, а также учителей биологии, аспирантов и учащихся.


Рекомендовано РИС университета


УДК

ББК


Введение

Глубокое и прочное усвоение основ генетики может быть достигнуто в результате серьезного знакомства с генетикой дрозофилы. Этот элемент учебной работы дает возможность не только закрепить полученные в теоретическом курсе знания, но и приобрести первые серьезные навыки в постановке самостоятельных опытов, являющихся своего рода введением в научно-исследовательскую или практическую деятельность. Ряд разделов генетики хромосомная теория наследственности, генетической теории определения пола и половой баланс, множественный аллелизм, мутагенез и другие разработаны на дрозофиле (плодовой, или уксусной, мухе). Дрозофила удобный объект генетических исследований. Она легко размножается в лабораторных условиях, имеет короткий цикл развития, исключительно плодовита, обладает четко выраженными морфологическими признаками. Благодаря большому числу спонтанных и индуцированных мутантных рас, часто характеризующихся четким проявлением измененных признаков, небольшому числу хромосом она может служить модельным объектом при проведении ряда практических работ со студентами.

На кафедре генетики, селекции и семеноводства для постановки опытов имеется ряд мутантных линий Dr. melanogaster, поддерживаемых в культуре. Студенты знакомятся с биологией, морфологией, генетикой и генетической номенклатурой дрозофилы; а также учатся готовить питательные среды. Студенты познают на занятиях основные правила работы с дрозофилой при постановке мух на скрещивание и анализе потомства в F1, F2, Fb. Обучаясь на опыте, студенты должны убедиться, что генетика основывается на строгих законах, позволяющих предвидеть те или иные явления и точно рассчитать их количественные закономерности.

Практикум рассчитан на 10-11 занятий по 6 часов каждое. В конце каждого занятия студенты решают задачи по теме.


ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №1


Тема. Биология, морфология и разведение дрозофилы.


Цель занятия: познакомить студентов с внешним строением дрозофилы, особенностями ее разведения, длительностью различных стадий жизненного цикла.

Материалы и оборудование: 1. пробирки с мухами дрозофилами (Drosophila melanogaster). 2. набор для работы с дрозофилой: капельница с эфиром, морилки (пробирки с ватными пробками), доска для работы с мухами, голубиное маховое перо.

Дрозофила является очень удобным объектом для генетических исследований и чисто учебных целей. Четыре наиболее важные особенности: 1) небольшой срок развития от яйца до взрослой мухи; 2) исключительно высокая плодовитость; 3) богатство наследственных рас или мутаций; 4) малое число хромосом.

Дрозофила впервые была использована в лабораторных опытах Карпентером для разработки некоторых биологических вопросов в самом начале прошлого столетия. В 1910 г. Т.Х. Морганом была обнаружена первая мутационно возникшая наследственная раса (мутант) дрозофилы, а именно белоглазая (white). Начиная с этого времени дрозофилу, усиленно начали изучать при проведении генетического и цитологического анализов ближайшие сотрудники Моргана (Стэртевант, Мёллер и Бриджес).

Ряд теоретических вопросов генетики искусственное получение мутации и природа гена, определение пола и локализация половых факторов в хромосомах, проблемы экспрессии гена, генетика популяции, механизм расо- и видообразования и многие другие проблемы интенсивно изучаются на дрозофиле. Эти и другие исследования имеют важное значение не только в генетике, но и в решении вопросов общей биологии и эволюции видов.

Drosophila melanogaster, иначе плодовая, или уксусная муха, принадлежит к семейству Drosophicidae из отряда Diptera. Это очень мелкая мушка, величиной около 2 .1 мм, с ярко-красными глазами и серым телом.

Родиной Dr. melanogaster считается Индо-малайская область. В настоящее время она почти космополит и населяет Северную и Южную Америку, Африку, Австралию, Японию и Южную Европу (до Северной Франции). В пределах России Dr. melanogaster обычна на Кавказе. На севере этот вид встречается до 60° северной широты, куда он проникает в летнее время вместе с потоком фруктов и овощей.

Питается дрозофила ферментируемыми фруктами, овощами, древесным соком. В лабораториях мух разводят на питательной среде, составляемой по разным рецептам.

Краткое описание: дрозофила относится к той её расе или форме, которая обитает в природе и поэтому носит название дикой (wild type), или нормальной (Normal).

В лабораторных условиях нормальной температурой для дрозофилы надо считать 24-25 ºС. При температуре несколько превышающей 31 ºС она становится бесплодной полностью или частично.

При нормальной температуре цикл развития дрозофилы от яйца до взрослой мухи длится приблизительно 10 суток. Развитие яйца составляет 20 часов, а развитие личинки и куколки 8 суток, то есть по 4 суток соответственно. Таким образом, имеется возможность получать в год 40 поколений дрозофил.

С понижением температуры развитие сильно замедляется. Так, при 10 ºС личиночный период растягивается до 57 дней, а куколочный - до 13-14 дней: при 20°С сроки соответственно равны 8 и 6,3 дня.

Продолжительность жизни взрослой мухи, то есть с момента вылупления её из куколки, в лабораторных условиях равна 3 - 4 неделям и в значительной мере зависит от условий содержания (температуры, влажности, пищи, плотности населения, наличия в питательной среде бактерий). В специальных опытах дрозофилы жили до 152 дней. Жизнеспособность мутантов в большинстве случаев понижена по сравнению с диким типом, хотя известны мутационные расы, обладающие повышенной по сравнению с нормальными мухами жизнеспособностью.

Самки и самцы дрозофилы несколько отличаются по величине и по ряду других морфологических признаков.




Рис.1. Дрозофила: 1 - самка: 2 - самец.


Самки несколько крупнее самцов (рис. 1). Брюшко у самки более округлое с заострённым концом; у самца оно боле цилиндрическое с притуплённым концом и сильно пигментированными (чёрными) несколькими последними тергитами. Тергитами у насекомых называют скелетные хитиновые пластинки брюшка со спинной стороны. У самки имеется 8 хорошо развитых тергитов, у самца - 6, причём шестой и седьмой тергиты слиты, а восьмой вошел в состав полового аппарата. Стернитами называют такие же хитиновые пластинки с брюшной стороны. У самки их 4, у самца - 3.

К числу вторичнополовых признаков относятся половые гребешки самца, представляющие собой ряд крепких хитиновых щетинок на правом членике лапки передних ног. У самки половые гребешки отсутствуют.


ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №2


Тема. Питательная среда и ее приготовление. Правила работы с дрозофилой, подготовка и постановка опытов.


Цель занятия: познакомить студентов с различными по составу питательными средами; приготовление студентами питательной среды для постановки скрещиваний

Материалы и оборудование: 1. ингредиенты для приготовления питательной среды. 2. оборудование для приготовления питательной среды (кастрюля, стакан, весы, разновесы).

Главными составными частями среды, на которой разводят дрозофилу в лабораториях, является сахар и дрожжи. Сахар вносят в среду в виде сахарозы, изюма, патоки или сусла. Он является тем субстратом, на котором развиваются дрожжи, которые, в свою очередь, служат основной пищей дрозофилы. Кроме того, дрожжи предохраняют среду от поражения плесенью.

В качестве составного компонента в питательную среду входит также агар-агар, который придаёт среде желеобразную консистенцию.

На дрожжевой среде мухи развиваются значительно быстрее, очень крупные, с прекрасным проявлением всех признаков. Однако, благодаря обилию мух и наличию в среде неблагоприятно действующих на дрозофилу бактерий и грибов, развившиеся на такой среде, мухи живут сравнительно недолго. Поэтому дрожжевую среду рекомендуют применять во всех случаях, за исключением поддержания основных линий.

Приготовленная питательная среда не может сохраняться дольше 3-4 дней, особенно когда она уже разлита в стаканчики, пробирки или флакончики, так как начинает развиваться плесень.

Для предупреждения развития в культурах плесени добавляют пропионовую кислоту или 10% спиртовой раствор нипагина (этилбензойная кислота).

Готовую среду можно хранить в холодильнике, где она может оставаться месяц и больше. При отсутствии прессованных дрожжей для варки среды можно пользоваться сухими дрожжами, произведя перерасчет на прессованные – пекарские дрожжи, содержащие 75% воды.

Рецепты наиболее распространенных питательных сред (в г)

1. Вода - 100 мл

2. Вода - 100 мл

5. Вода - 700 мл

Бананы - 100

Изюм - 50

Агар-агар - 9

Агар-агар - 2

Агар-агар - 2

Дрожжи пекарские - 75







Сахарный песок - 25







Манная крупа - 25

3. Вода - 2000мл

4. Вода - 350мл




Патока - 200

Агар-агар - 4,5




Кукурузная мука - 150

Дрожжи - 40




Агар-агар - 15

Манная крупа - 15







Сахароза - 13





Рецепт №3 рекомендуется для поддержания основных линий дрозофилы с интервалом между пересадками до 2 месяцев. На кафедре для приготовления питательной среды используют рецепт №5.

Приготовление питательной среды.

Ниже приводится способ приготовления питательной среды, по рецепту №5 на 100 пробирок.

  1. Растворяют 9 г агар-агара в 700 мл холодной воды и доводят до кипения.

  2. Добавляют 75 г прессованных дрожжей (или 9 г сухих дрожжей) в кипящий агар-агар и варят на медленном огне 40 мин.

  3. Добавляют 25 г манной крупы и 25 г сахарного песка и варят помешивая еще 15 минут.

4. Для предохранения приготовленного корма в дальнейшем от заплесневения необходимо добавить 1 мл пропионовой кислоты в корм, остудив его предварительно до 60° и разлить в пробирки примерно на 1 - 1,5 см их высоты. Пробирки закрывают пробкой из натуральной чистой ваты.

Разливать среду следует так, чтобы она не попадала на стенки пробирки, тонкий слой её скоро подсыхает, и отложенные на нём яйца погибают. Во избежание этого рекомендуется разливать среду при помощи воронки, укреплённой на штативе. На горлышко воронки разливают мягкую резиновую трубку с моровским зажимом.

Через 30-40 минут среда застывает в виде довольно плотного желе. После этого её поверхность засевают дрожжами, добавляют 1-2 капли дрожжевого молочка (2-3г обычных дрожжей разводят в 50 мл воды), и среда готова к потреблению.

Правила работы с дрозофилой. Все манипуляции с мухами выполняют под наркозом. В качестве наркотизирующего вещества употребляют серный эфир рrо narcosi. Наркоз мух проводят морилкой (эфиризатором), который представляет собой пробирку с корковой пробкой. Внутри помещается ватный тампончик, смоченный эфиром. Осторожным встряхиванием или постукиванием пальцами о стенки пробирки следует перегнать мух подальше от пробки, затем быстро открыть её (можно накрыть марлей или сеткой) и столь же быстро приставить к отверстию морилки. Как только мухи перестанут двигаться, их нужно тотчас вытряхнуть на чистый лист бумаги. От большей дозы наркоза мухи погибают через 3-5 мин. Характерный признак погибших от эфира мух растопыренные кверху и в сторону крылья и безжизненно вытянутые лапки.

Знакомство с морфологическими особенностями мух удобнее всего производить под слабым увеличением бинокуляра, лупы с увеличением х 4, располагая мух на молочно-белом стекле. Мух можно передвигать при помощи препаровальной иглы тонкой кисточки или перышка. Брать усыпленных мух можно глазным пинцетом за крылышки или ножки (если особи бескрылые).

Если во время просмотра мухи начинают просыпаться от наркоза, их следует накрыть часовым стеклом или половинкой чашки Петри, под которые положен кусочек ваты, смоченный эфиром (1-2 капли).

Подготовка мух и постановка опытов. Для скрещивания необходимо брать заведомо девственных самок не старше 10-12 часов после вылупления. Для этой цели из тех культур, из которых надлежит взять девственных самок, за несколько часов до начала массового вылета мух, следует удалить родительских мух. После этого культуру просматривают через 8-10 часовые интервалы. Вылупляющихся девственных самок изолируют от самцов и используют для соответствующих скрещиваний.

В каждый флакончик с емкостью 20 мл с 5-6 мл питательной среды следует сажать 2-3 самки и 2-3 самцов. Превышение указанной нормы может привести к перенаселению в культуре (crowding effect), что влечет за собой значительное измельчение мух и сокращение продолжительности их жизни.

Первые 1,5-2 сутки после вылупления самка дрозофилы не откладывает яиц. В среднем одна самка откладывает 200-300 яиц. Кладка яиц лучше всего происходит на среду, на которой достаточно хорошо проросли дрожжи. Этот оптимум откладки яиц лежит между 24-36 часов, после того как питательная среда была засеяна дрожжами. По мере старения культуры и усиления брожения питательной среды интенсивность откладки яиц падает. Работы с дрозофилой должны фиксироваться в дневнике или книге протоколов опытов (табл. 1).

Таблица 1

Примерная форма дневника практической работы

Дата

Порядковый номер культуры

Краткое описание скрещиваний

Результат

10.x

15

Normal ♀♀ ×♂♂ b (из основных культур)

150 мух Normal

(♀♀ и ♂♂)

22.x

24

♀♀ из №15×♂♂ b (из основных культур)

89 Normal и 76 black

22.x

25

♀♀ ×♂♂ из №15 и т. д.

195 Normal и 57 black


ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ№3


Тема. Сравнительная характеристика мутантов


Цель занятия: знакомство студентов с основными учебными линиями дрозофил, имеющихся для работы на кафедре.

Материалы и оборудование: 1. пробирки с линиями мух дрозофил (Drosophila melanogaster). 2. набор для работы с дрозофилой.

К числу органов дрозофилы, чаще подвергающихся мутационным изменениям, относятся глаза, крылья и щетинки.

Глаза нормальной мухи устроены по обычному типу сложных фасеточных глаз насекомых. Сложный глаз состоит из многих простых глазков-фасеток или омматидий (рис. 2). Число их у самок 780, у самцов около740. Мутации, затрагивающие различные особенности глаз весьма разнообразны. Наиболее многочисленны те, которые изменяют свойственную диким мухам пигментацию глаза, усиливая её до цвета бордо или сепии или ослабляя до бесцветного, белого. Между ними имеются всевозможные переходы, такие как: эозиновый, вишнёвый, абрикосовый, розовый, коралловый, карминовый, багряный, винно-красный и др.

Большое число мутаций затрагивают форму глаза, строение и расположение фасеток. У нормальной мухи фасетки расположены наподобие ячеек пчелиных сот (рис. 2,1). У мутантов нарушена правильность расположения фасеток.



Рис 2 . Форма и расположение глазных фасеток и волосков. 1 – нормальная муха, 2 – мутант Star (звёздчатые глаза)



Рис. 3. Форма и размеры глаз. 1- нормальная самка; 2 - гомозиготная самка Bar; 3- самец Ваr; 4 -гетерозиготная самка Ваr.

Мутационные изменения, приводящие к частичной или полной редукции глазных фасеток, вследствие чего, поверхность глаза представляется ровной и гладкой. Это такие как: мутации Ваг (полосковидные глаза), Lobe - лопастные, eyeless - безглазый и др. У мутантной самки Ваг число фасеток в глазе не превышает 70, у Lobe или eyeless и вовсе могут отсутствовать (рис.3). В связи с этим общие размеры головы мух резко уменьшены по сравнению с головой нормальной мухи.

Мутационные изменения, затрагивающие крыло, условно можно разделить на 3 группы (рис.4 -9).

I группа. Мутанты, модифицирующие общую конфигурацию крыла.





Рис.4. Мутант curled (загнутые крылья) Вид спереди и сбоку.





Рис. 5. Мутант Delta (дельтообразные расширения продольных жилок утолщения на дистальном конце крыла)

Рис. 6 . Мутант Notch (вырезки на дистальном конце крыла, III и IV продольных жилок)



Рис.7. Аллельные мутанты серии cut. Отличаются по степени зазубренности крыльев



Рис.8. Аллельные мутанты серии Vestigial. 1 - vestigial (зачаточные крылья); 2 - antlered (оленерогий); 3 - strap (полосковидные крылья).




Рис.9. Мутант apterous (бескрылый)

В отличие от крыла нормальной мухи, являющегося плоским, прямым, у различных мутантов оно может быть изогнуто в виде арки (мутант arc), лыжи (ski), закручено кверху (Curly, curled), книзу (curved) или своим положением во время полета напоминать крыло самолета, по сходству с которым один из таких мутантов получил свое название (aeroplane) и т.д.

II группа. Мутанты, вызывающие изменения в жилковании крыла. Эти изменения выражаются в частичном или полном исчезновении одной или нескольких жилок (например, crossveinless), в развитии одной или нескольких добавочных жилок (например, plexus, Delta).

III группа. Многочисленный класс мутантов, уменьшающих крыло в той или иной степени: cut, dumpy - вырезанный, small wing - маленькие крылья, rudimentary - зачаточные крылья, apterous - бескрылый (рис.7-9).

Генетическая номенклатура Dr. melanogaster.

У дрозофилы отмечено около тысячи генных мутаций, имеющих морфологическое, физиологическое, биохимическое, летальное проявление; множество хромосомных мутаций; получены все жизнеспособные типы анеуплоидов, а также триплоидные самки. Возникла необходимость создания специальной генетической номенклатуры, определённого генетического «языка», обозначений и символов. Первой сводкой по генетической номенклатуре был справочник К.Б. Бриджеса и К. Бреме, опубликованный в 1914 году. Второй справочник, в котором учтён прогресс генетики дрозофилы, опубликован Д.Л. Линдсли и Е. Греллом в 1968г. На основе данных этого справочника М.Д. Голубовским был проведён анализ организации генома и фенотипического проявления мутации у дрозофилы.

По степени изученности, чёткости проявления и лёгкости классификации мутанты дрозофилы Бриджесом выделены на 5 категорий (обозначены арабскими цифрами 1-5 в конце характеристики каждого мутанта).

  1. Мутанты, наиболее изученные и интенсивно используемые, с чёткой классификацией, хорошей жизнеспособностью и точной локализацией.

  2. Мутанты, аналогичные мутантам первой категории, но используемые менее интенсивно. Локализованы недостаточно точно.

  3. Немногочисленные мутанты с чётким проявлением признаков, но локализованы недостаточно точно.

  4. Мутанты менее удобные, но интенсивно используемые в специальных исследованиях. Локализованы не вполне точно.

  5. Мутанты, обнаруживающие трансгрессию с диким типом. Локализация недостаточно точная.

Буква А при категории обозначает ненормальный перекрест, обязанный данной абберации.

Генные мутации

Фенотип и генотип дикого типа считаются нормальными. Наследуемые отклонения от этого стандарта называются мутациями. Каждой мутации даётся название, отражающее основные, самые яркие мутантные признаки. Название мутации - обычно короткое и простое прилагательное (например, black) или существительное (например, Ваг), чаше английское или латинское.

Для удобства каждой мутации соответствует свой символ это сокращение названия, однозначно определяющее данную мутацию. Он всегда начинается с той же буквы, что и название мутации, пишется всегда курсивом и никогда не содержит греческих букв, подстрочных подписей и промежутков между буквами. Название и символ рецессивной мутации пишутся со строчной буквы, например black, b и dumpy, dp. Если мутант признак распознаётся в гетерозиготе, то мутация "классифицируется как доминантная, и её название и символ пишутся с заглавной буквы, например Ваг, В и Notch, N.

Аллели одного локуса имеют одно и то же название и символ и отличаются друг от друга соответствующими индексами (дата открытия; инициалы исследователя, сокращение названия мутации, которое использовалось до того, как был установлен аллелизм, номер эксперимента, в котором была обнаружена мутация).

Мутации разных локусов, имеющие одинаковое фенотипическое проявление, могут иметь каждая своё название; например, мутации vermilion, cinnabar, scarlet, karmosin, cardinal обуславливают ярко-красный цвет глаз.

Мутации летали, со сходным фенотипическим проявлением обозначаются как 1, например 1 (1)7 деталь №7 в первой хромосоме; 1(3)с деталь в третьей хромосоме, возникшая в линии ebony.

Мутации, подавляющие проявление другой мутации, обозначаются su или Su (supressor), а усиливающие е или Е (enchancer), далее в скобках указывают символ мутации, действие которой модифицируется, например su (w") или К (S).

Нормальные аллели обозначаются либо знаком +, либо с индексом плюс:b +. Знаком «–» обозначают отсутствие какого-либо локуса, например bb.

Данные о локализации мутации приводятся в таком виде: номер хромосомы, затем через чёрточку место в хромосоме. Например, для white, локализованной на 1,5 единиц карты в I хромосоме, написано I, 1,5. У дрозофилы первая группа сцепления соответствует X хромосоме, вторая и третья двум большим аутосомам и четвёртая маленькой аутосоме. Номера хромосом пишутся арабскими или римскими цифрами (в ранних работах номера хромосом обозначались римскими цифрами).

Мутации на генетической карте локализуются с точностью до десятых долей. Так, локализация 3,0 единиц карты является более точной, чем 3 единицы карты. При неточной локализации пользуются знаком ±.

При описании линий, имеющих несколько мутаций в одной хромосоме, символы мутация записывают в порядке их расположения на генетической карте и разделяют промежутками, например у w f В. Символы мутаций, находящихся в гомологичных хромосомах, разделяют наклонной линией, например, у w f/B, Cy/Pm.

При описании линий, содержащих мутации в негомологичных хромосомах, символы - мутаций, принадлежащих к негомологичным хромосомам, разделяют точкой с запятой и промежутком. Например, у we sn; b sp.

Список мутантных линий Drosophila melanogaster, используемых на практических занятиях большого практикума на кафедре общей генетике, селекции и семеноводства КБГУ.

Д-32. Дикий тип.

Canton S, K-c. Дикий тип

Bar, B, I, 57,0. Полосковидные глаза. Гомозиготы жизнеспособны. Дупликация (1).

black, b, II, 48,5. Чёрный. Тело, ножки, жилки очень тёмные (1).

brown, bw, II, 104,5. Коричневоглазый. Цвет глаз от коричневого до гранатового (1).

cinnabar, сn, II, 57,5. Киноварноглазый. Цвет глаз яркий, шарлаховый, глазки бесцветные (1).

cut, ct, I, 20,0. Обрезанный край крыла (1).

dumpy, dp, II, 13,0. Короткокрылый. На груди воронкообразные углубления (1).

ebony, e, III, 70,7. Чёрный цвет тела (1).

scarlet, III, 44,0. Шарлаховый, багряно-красный цвет глаз, глазки бесцветные. (1).

vestigial, vg, II, 67,0. Зачаточнокрылый. Крылья и жужжальца зачаточные (1).

white, w. I, 1,5. Белоглазый. Глаза белые, глазки, мальпигиевые сосуды и семенники бесцветные (1).

yellow, у. I, 00. Жёлтый цвет тела; ротовой аппарат личинки коричневый (1).

vermilion, v, I, 33,0. Киноварный цвет глаз, глазки бесцветны (1).

white apricot, w a, I, 1,5. Абрикосовые глаза. Аллеломорф white.

cut vermilion, ctv, I, 20,0-33,0. Обрезанный край крыла, киноварные глаза.

white cut, wct, I, 1,5-20,0. Белоглазый, обрезанный край крыла.

scarlet spineless, stss, III, 44,0-58,5. Шарлаховый, багряно-красный цвет глаз, бeсщетинковый.

meller-5 (w aB), m-5, I, 1,5-57,0. Полосковидные абрикосовые глаза.

black cinnabar vestigial, bcnvg, II, 48,5-57,5-67,0. Черный, киноварноглазый, зачаточнокрылый.


ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №4


Тема. Моногибридное скрещивание у дрозофилы


Цель занятия: освоение методики постановки опытов по скрещиванию дрозофил; закрепление знаний по основным закономерностям наследования при моногибридном скрещивании.

Материалы и оборудование: 1. пробирки или стаканчики со средой по 2 на каждого студента для получения F1 и по 4-6 для получения F2. 2. соответствующие мутанты и мухи дикого типа. 3. набор для работы с дрозофилой.

Задание. 1. Отобрать виргинных самок. 2. Поставить скрещивание в соответствии с разработанным заданием. 3. Получить F1 и проанализировать его. 4. Поставить на скрещивание мух F1. 5. Получить F2 и проанализировать его.

Пояснения к заданию. Отбор виргинных самок. Для постановки опытов по скрещиванию необходимо в качестве материнских форм брать заведомо девственных (виргинных) самок не старше 10 - 12 ч после вылупления. С этой целью в пробирках, где идет размножение соответствующих линий мух, удаляют родительские особи и вылупившихся из куколок мух. Через 6 - 8 ч пробирки или стаканчики просматривают, и если появились молодые мухи, их усыпляют, отделяют самцов от самок, помещают в отдельные пробирки с питательной средой. Там они могут находиться в течение 2 - 4 суток. По мере надобности их используют для скрещивания.

Эту работу удобно организовать следующим образом. За 4 - 8 ч до начала занятий из пробирки удаляют всех мух. Пробирку с куколками ставят в термостат с температурой 24-26°С на 4 - 8 ч. Мух, вылупившихся из куколок за этот период, используют для скрещивания.

Желательно в каждом случае ставить реципрокные (прямые и обратные) скрещивания. Гибриды F1, как и обычные линии, размножаются внутри себя без отбора виргинных самок, поэтому после анализа гибридов F1, самцов и самок помещают в пробирки со свежей средой для получения F2. На протяжении всего опыта, а он от момента постановки скрещивания и до получения F2 продолжается 20 - 24 дня, следует внимательно следить за состоянием мух и обеспечить все условия для их нормального развития.

При проведении моногибридного скрещивания учащиеся должны ознакомиться с первым и вторым законами Менделя, усвоить понятия о генотипе, фенотипе, доминантных и рецессивных признаках, о реципрокных, возвратных и анализирующих скрещиваниях. Для постановки опыта в качестве одной из родительских форм следует взять линию дикого типа (Normal), а в качестве второй родительской формы можно взять одного из мутантов, vestigial, cinnabar, ebony, brown, black, curved и др.

Весьма удобно провести следующие прямые и обратные (реципрокные) скрещивания, позволяющие изучить наследование доминантных и рецессивных признаков:

Canton S (Д-32) x black – black x Canton S (Д-32)

Canton S (Д-32) x brown – brown x Canton S (Д-32)
  1   2   3   4   5

Добавить в свой блог или на сайт

Похожие:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconРоссийской федерации государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «санкт-петербургский государственный университет экономики и финансов» Деканат общеэкономического факультета
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconГосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «южно-российский государственный технический университет (новочеркасский политехнический институт)»
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconГосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «воронежская государственная медицинская академия имени н. Н. Бурденко»
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconПравила приема в государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Тульский государственный педагогический университет им
В государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconФедеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «тюменская государственная академия культуры и искусств» Институт сервиса и социально-информационных коммуникаций
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconФедеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «санкт-петербургский государственный университет кино и телевидения» С. Ф. Алексеева, В. И. Большаков
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconРоссийской Федерации Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Челябинский государственный университет»
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconФедеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «московский государственный технический университет гражданской авиации» (мгту га)
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconГосударственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «томский государственный педагогический университет» (тгпу) Утверждаю
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования iconГосударственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «томский государственный педагогический университет» (тгпу) Утверждаю
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования


Разместите кнопку на своём сайте:
lib.convdocs.org


База данных защищена авторским правом ©lib.convdocs.org 2012
обратиться к администрации
lib.convdocs.org
Главная страница